微綠球藻DNA質粒文庫的構建

微綠球藻(Nannochloropsis oculata)DNA被提取純化并經(jīng)超聲波處理后,將所得大小在1.6～3 kb之間的DNA片段用T4 DNA聚合酶補平,再與Sma Ⅰ酶切消化并經(jīng)去磷酸化處理的質粒載體pUC18連接,轉化至DH10B大腸桿菌(Escherichia coli)的感受態(tài)細胞中.建立的DNA質粒文庫容量含2×104個克隆,其中重組子占90%.隨機挑選白色菌落并培養(yǎng),抽提的質粒經(jīng)Xba Ⅰ和Sac Ⅰ雙酶切鑒定,顯示重組的質粒中均含有大小不等的DNA插入片段.

作 者： 趙大顯 周志剛 ZHAO Da-xian ZHOU Zhi-gang   作者單位： 上海水產大學,農業(yè)部水產種質資源與養(yǎng)殖生態(tài)重點開放實驗室,生命科學與技術學院,上海,200090  刊 名： 海洋科學  ISTIC PKU 英文刊名： MARINE SCIENCES  年，卷(期)： 2006 30(5)  分類號： Q78  關鍵詞： 微綠球藻(Nannochloropsis oculata)   超聲處理   質粒載體pUC18   DNA文庫  

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