綿羊胎兒成纖維細胞不同處理對核移植重構胚發(fā)育的影響

研究供體細胞代數、大小、周期以及基因轉染處理對重構胚發(fā)育的影響.結果如下:(i)體外培養(yǎng)5～7代細胞做供體核,重構胚的桑椹/囊胚率顯著高于16～18代細胞的桑椹/囊胚率(17.3%vs.4.9%,P＜0.05);(ii)15～25 μm細胞做供體核,重構胚的桑椹/囊胚率為20.0%,高于8～15 μm細胞、25～33 μm細胞桑椹/囊胚率(8.0%,9.7%),但效果不顯著(P＞0.05);(iii)血清饑餓與非血清饑餓的細胞做供體核,重構胚的桑椹/囊胚發(fā)育率沒有顯著性差異(11.8%vs.18.6%,P＞0.05),但非血清饑餓的效果要好于血清饑餓;(iv)用0.05 μmol/L秋水仙素處理供體細胞效果最好,重構胚的桑椹/囊胚率可達27.5%,而未處理或用0.1 μmol/L秋水仙素處理供體細胞,重構胚的桑椹/囊胚率分別為17.1%和12.1%,但三者之間差異不顯著(P＞0.05);(v)以轉染綠色熒光蛋白基因(GFP)細胞做供體核,重構胚的桑椹/囊胚率顯著低于非轉基因細胞做供體核的桑椹/囊胚率(3.1%vs.20.4%,P＜0.05).上述結果表明,傳代少、中等大小的細胞更適合做供體核;血清饑餓沒有必要;用0.05 μmol/L秋水仙素處理供體細胞有利于重構胚的發(fā)育;轉基因供體細胞對重構胚發(fā)育有影響.

作 者： 王海 敖紅 潘求真 李榮旗 趙孟彬 連正興 李寧 吳常信   作者單位： 王海(中國科學院動物研究所,北京,100080;中國農業(yè)大學動物科技學院,北京,100094)

敖紅(中國農業(yè)科學院畜牧研究所,北京,100094)

潘求真(東北農業(yè)大學,哈爾濱,150030;中國農業(yè)大學動物科技學院,北京,100094)

李榮旗,趙孟彬(北京錦繡大地農業(yè)股份有限公司,北京,100049)

連正興,李寧(中國農業(yè)大學動物科技學院,北京,100094;中國農業(yè)大學農業(yè)生物技術國家重點實驗室,北京,100094)

吳常信(中國農業(yè)大學動物科技學院,北京,100094) 

刊 名： 中國科學C輯  ISTIC PKU 英文刊名： SCIENCE IN CHINA (SERIES C)  年，卷(期)： 2006 36(5)  分類號： Q95  關鍵詞： 綿羊   胎兒成纖維細胞   核移植   秋水仙素   血清饑餓   綠色熒光蛋白基因(GFP)  

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